CAR-T细胞疗法（嵌合抗原受体T细胞疗法）是一种创新的癌症免疫疗法，目前，FDA已批准了5款CAR-T细胞疗法上市，用于治疗白血病、淋巴瘤和骨髓瘤等血液瘤。这几款均为自体CAR-T细胞疗法，这种从癌症患者自身T细胞定制的疗法价格昂贵，且需要复杂的生产流程，可扩展性有限，而且在不同患者间质量差异较大，导致治疗效果难以预测。此外，对于病情进展较快的癌症患者来说，这种自体CAR-T细胞疗法的生产周期会导致治疗延误。
“现货型”的异基因CAR-T细胞疗法具有克服上述挑战的潜力，从而为更广大的癌症患者带来细胞治疗的机会。但这种异基因CAR-T细胞疗法也面临着两大障碍。首先，异基因CAR-T细胞可能导致移植物抗宿主病（GvHD），其次，异基因CAR-T细胞可能被宿主免疫系统迅速消除，即所谓的宿主抗移植物病（HvGD），从而限制其抗肿瘤活性。这导致了当前的“通用型”CAR-T细胞疗法易受到免疫排斥，难以在患者体内持续存在，因此不足以产生比肩自体CAR-T细胞疗法的效果。
近日，Sana Biotechnology的研究人员在NatureCommunications期刊发表了题为：Hypoimmune anti-CD19 chimeric antigen receptor T cells provide lasting tumor control in fully immunocompetent allogeneic humanized mice的研究论文。
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该研究通过CRISPR-Cas9基因编辑敲除了T细胞的TRAC、B2M和CIITA基因，从而构建出了人类低免疫（HIP）T细胞。然后，使用慢病毒载体让这些HIP T细胞过表达CD47和CD19 CAR，构建出了异基因HIP CD19 CAR-T细胞。
该研究进一步证明了，异基因HIP CD19 CAR-T细胞在免疫功能正常的人源化小鼠肿瘤模型中是安全的，且能够实现持久、有效的肿瘤清除效果。
该研究表明，基于低免疫T细胞的“通用型”CAR-T细胞疗法能够达到目前只有自体CAR-T细胞疗法才能达到的治疗效果，这有助于更广大的癌症患者及时获得细胞治疗。目前已经有一些临床试验使用CRISPR-Cas9基因编技术来构建“通用型”CAR-T细胞。例如，敲除T细胞的TRAC基因（表达T细胞受体α链），从而消除T细胞受体（TCR），避免移植物抗宿主病（GvHD），敲除T细胞的CD52，可在抗CD52单抗存在的情况下提高通用型“通用型”CAR-T细胞细胞的扩增持久性。然而，长期使用抗CD52单抗治疗可能会增加毒性和机会性感染的风险。
尽管目前有各种基于基因编辑的“通用型”CAR-T细胞疗法，但它们的抗肿瘤反应和持久性通常不如自体CAR-T治疗有效。
向患者移植“通用型”CAR-T细胞后，还要预防人体免疫系统对这些CAR-T细胞的排斥，即排异反应。敲除B2M和CIITA基因，从而消除人类白细胞抗原（HLA），能够阻止排异反应，但这也会导致这些CAR-T细胞容易被先天免疫杀伤。而CD47是一种“别吃我”信号，过表达CD47能够防止被先天免疫细胞杀伤。
在这项研究中，Sana Biotechnology的研究团队目标是开发出“通用型”异基因CAR-T细胞，以逃避患者免疫系统并产生持久的抗肿瘤反应。
研究团队使用CRISPR-Cas9基因编辑技术，敲除了T细胞的TRAC、B2M和CIITA基因，从而构建出了人类低免疫（HIP）T细胞。然后，使用慢病毒载体让这些HIP T细胞过表达CD47和CD19 CAR，构建出了异基因HIP CD19 CAR-T细胞。
研究团将这些异基因HIP CD19 CAR-T细胞与只表达了CD19 CAR的异基因CD19 CAR-T细胞进行比较。
体外癌症杀伤和耗竭实验显示，异基因CD19 CAR-T细胞和异基因HIP CD19 CAR-T细胞之间没有差异，这证实了通过CRISPR-Cas9基因编辑构建的低免疫（HIP）没有对T细胞性能产生负面影响。
在免疫缺陷小鼠中，异基因HIP CD19 CAR-T细胞对CD19阳性肿瘤的清除效果，与异基因CD19 CAR-T细胞。
更重要的是，在免疫功能正常的人源化小鼠模型中，异基因HIP CD19 CAR-T细胞明显优于异基因CD19 CAR-T细胞，展现了更好的持久性和扩增能力，并且带来了持久的肿瘤清除效果。
此外，研究团队还考虑到了CD47过表达可能带来的潜在失控问题，他们使用CD47靶向融合蛋白，抑制CD47的过表达，能够可靠且特异性地消除体内的异基因HIP CD19 CAR-T细胞。
这些发现表明，基于异基因的HIP CAR-T细胞的“通用型”细胞疗法，可能克服与异基因CAR-T细胞持久性差的限制，发挥更持久的抗肿瘤反应。
